当前位置:首页>蛋白免疫相关试剂>壹步显影-单组份ECL发光液(超敏)
产品介绍:
该产品以化学发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子,可通过辣根过氧化物酶(HRP) 实现目的蛋白或核酸的免疫印迹检测。
本产品为新型单组分即用型试剂,突破了传统发光液,不需使用前需要 A 液和 B 液等体积混匀的常规模式,操作更加便捷,有效避免吸液中的试剂损耗 和交叉污染,提高了结果的一致性和重复性。
该产品可检测低 pg 级的微量蛋白且荧光 持续时间长。印迹膜(如 NC、PVDF)经过 ECL 工作液孵育后,可用 X 光胶片曝光,也可以直 接进行 CCD 扫描拍照。
验证结果:
使用方法(仅供参考) :
1、转膜后用丽春红染色,确定有蛋白,至孵育完二抗,用TBST/TBS 洗涤二抗3-5次。
2、用平头镊取出印迹膜,搭在滤纸上沥干洗膜液。吸取 ECL 发光液 均匀滴加至印迹膜上,确保完全均匀覆盖(约为 60 μl/cm2),室温孵育 1 min。如果待检测蛋白丰度很高,请尽量不要让发光液处于静止 状态,以免局部反应过快影响检测信号的线性范围。
3、用平头镊夹住印迹膜,弃去 ECL 发光液,用滤纸吸去多余发光液。
4、快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间,尽量赶尽气泡。
5、X 光胶片曝光:将印迹膜蛋白面朝上,放于 X 光胶片暗盒内,根据显色情况选择适当曝光时间,显影定影。也可选择不同时间多次曝光,以达更佳 效果。
6、CCD 成像:无需置于保鲜膜中,可直接按照成像仪使用说明进行拍照。 适用范围 本产品适用于 Western Blot、EMSA 等基于 HRP 标记的抗体或核酸探针的蛋白和核酸印 迹检测。
产品优势:
1、操作便捷:即用即取,减少污染
2、高灵敏度:可检测低 pg 级蛋白
3、荧光持续时间长:可曝光显影的时间达30分钟以上
注意事项:
1、由于本产品发光液灵敏高,推荐抗体稀释比例为一抗 1:1,000 - 1:4,000,二抗 1:5,000 - 1:10,000。抗体浓度过高可能造成高背景或因条带过曝产生反白现象。
2、ECL 发光液是 HRP 的显色底物,因此检测系统最终必须是基于 HRP 标记抗体。
3、根据目的蛋白丰度不同,曝光时间可能是数秒至数小时。曝光时间不足会导致目的条 带不明确,曝光时间过长会使背景加深。
4、叠氮化钠(NaN3)能抑制 HRP 活性,若回收 HRP 标记探针或者抗体应避免使用 NaN3, 如必需使用请勿超过 0.01%。
5、由于本试剂中含有氧化剂,易被还原而失效,使用后请盖紧瓶盖,以防失效。
6、使用本试剂时注意有效防护,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品在文章中的写法:
英文: Dowobio (Shanghai,China)
中文: 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio,上海


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